Фармацевтическая композиция и способ увеличения роста волос

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ УВЕЛИЧЕНИЯ РОСТА ВОЛОС Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей эффективное количество наночастиц серебра и экстракты Polygonum Multiforum Thunb, способу увеличения роста волос путем местного введения указанной фармацевтической композиции хозяину и ее применению.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: СКАЙЛАЙТ ТЕКНОЛОДЖИ ЛИМИТЕД (НК) Область, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей эффективное количество наночастиц серебра и экстракты Polygonum Multiforum Thunb, способу увеличения роста волос путем местного введения указанной фармацевтической композиции хозяину и применение фармацевтической композиции для производства лекарственных препаратов для увеличения роста волос у хозяина. Предпосылки создания изобретения Наночастицы металлов вызывают повышенный интерес у химического общества благодаря их важному практическому применению во многих областях, таких как катализ и наноэлектроника (ссылки: (a)Lewis L. N. Chem. Rev. 1993, 93, 2693). В последнее время большие усилия были приложены для развития биомедицинских применений наночастиц металлов. Несмотря на то, что значительные успехи были достигнуты в биологическом мечении (ссылки: а) Nicewarner-Pena S. R.; Freeman R. G.; Reiss В. D.; He L.;Pena D. J.; Walton I. D.; Cromer R.; Keating С. D.; Natan M. J. Science 2001, 294, 137. (b) Elghanian R.; Storhoff J. J.; Mucic R. C; Letsinger R. L.; Mirkin, С. A. Science 1997, 277, 1078), в литературе существует мало указаний на терапевтические применения наночастиц металлов. Важным примером является применение наночастиц серебра, обладающих антимикробными свойстами, для заживления ран (Wright J. В.; Lam K.;Hansen D.; Burrell R. E. Am. J. Inf. Cont. 1999, 27, 344). Очаговая алопеция представляет собой состояние, при котором происходит потеря волос на волосистой части головы и в других местах на теле человека. Сообщалось, что очаговая алопеция связана с аутоиммунитетом, посредством которого волосяные фолликулы атакуются самой иммунной системой,приводя к прекращению роста волос. Другим наблюдением является то, что высокие уровни естественного гормона, называемого дигидрокситестостерон (DHT), присутствуют в коже головы человека, генетически предрасположенного к мужской форме потери волос, при этом фаза роста волос является сокращенной. В результате, волосы становятся настолько маленькими, что практически невидимы. Если не остановить данный процесс, это может привести к классическому мужскому типу облысения. Очаговая алопеция обычно начинается с одного или более маленьких, круглых, гладких проплешин на коже головы и может прогрессировать до полной потери волос на коже головы (генерализованная алопеция) или полной потере волос на теле (универсальная алопеция). С эпидемиологической точки зрения очаговая алопеция поражает примерно 1,7% населения по всему миру, включая более чем 4,7 млн человек только в США, и данное состояние/заболевание оказывает сильное влияние на собственный образ и уверенность в себе, тем самым поражая качество жизни, как на работе, так и в школе. Очаговая алопеция может возникать у мужчин и женщин всех возрастов и рас. Ее проявление чаще всего начинается в детстве/старшем подростковом возрасте и может быть психологически разрушительным. Хотя очаговая алопеция не представляет угрозу для жизни, она наверняка меняет образ жизни, и ее неожиданное начало, циклические вспышки и непредсказуемое направление имеют глубокое психологическое воздействие на жизнь пораженных данной болезнью людей. Сущность изобретения Комбинированное использование покрытых PVP наночастиц серебра и Polygonum MultiforumThunb оказывает синергическое действие, которое способствует росту волос. Фармацевтическая композиция, включающая эффективное количество наночастиц серебра и экстракты Polygonum MultiforumThunb, является более действенной в индуцировании роста волос, чем взятые отдельно наночастицы серебра. Таким образом, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей эффективное количество наночастиц серебра, по меньшей мере один стабилизатор, экстракты PolygonumMultiforum Thunb и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый разбавитель. Стабилизатором может являться, например, один или более белков и/или пептидов, предпочтительно человеческий сывороточный альбумин или трансферрин и более предпочтительно человеческий сывороточный альбумин (HSA). В одном варианте стабилизатором является поливинилпирролидон. Предпочтительно, чтобы экстрактами Polygonum Multiforum Thunb являлись экстракты корней Polygonum Multiforum Thunb, и более предпочтительно этанольные экстракты Polygonum Multiforum Thunb. В одном варианте наночастицы серебра в фармацевтической композиции имеют диаметр от 1 до 100 нм. В одном варианте концентрация наночастиц серебра в фармацевтической композиции составляет от 10 мкМ до 10 мМ, и предпочтительно от 10 мкМ до 1 мМ. В одном варианте концентрация экстрактов Polygonum Multiforum Thunb в фармацевтической композиции составляет от 1 до 1000 г/л и предпочтительно от 1 до 100 г/л. В предпочтительном варианте фармацевтическая композиция настоящей заявки включает разбавитель, выбранный из группы, состоящей из воды, этанола, DMSO, ацетонитрила, буфера Hepes, фосфатного буфера, Tris-буфера, цитратного буфера, сыворотки или прочих видов физиологически значимого растворителя или раствора и их смеси. Настоящее изобретение также относится к способу увеличения роста волос, включающему местное введение фармацевтической композиции настоящего изобретения хозяину, нуждающемуся в этом. Хозяином предпочтительно является человек. Настоящее изобретение также относится к применению фармацевтической композиции, описанной здесь ранее, для производства лекарственных препаратов для увеличения роста волос у хозяина. Настоящее изобретение также относится к применению фармацевтической композиции, включающей эффективное количество наночастиц серебра и экстрактов Polygonum Multiforum Thunb, для производства лекарственных препаратов для увеличения роста волос у хозяина. Для применения настоящего изобретения фармацевтическая композиция включает эффективное количество наночастиц серебра, экстракты Polygonum Multiforum Thunb, по меньшей мере один стабилизатор и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый разбавитель. Для применения настоящего изобретения стабилизатором может являться, например, один или более белков и/или пептидов, предпочтительно человеческий сывороточный альбумин или трансферрин и более предпочтительно человеческий сывороточный альбумин (HAS). В одном варианте стабилизатором является поливинилпирролидон. Для применения настоящего изобретения предпочтительно, чтобы экстрактами Polygonum Multiforum Thunb являлись экстракты корней Polygonum Multiforum Thunb и более предпочтительно этанольные экстракты корней Polygonum Multiforum Thunb. В одном варианте применения настоящего изобретения наночастицы серебра в фармацевтической композиции имеют диаметр от 1 до 100 нм. В одном варианте применения настоящего изобретения концентрация наночастиц серебра в фармацевтической композиции составляет от 10 мкМ до 10 мМ и предпочтительно от 10 мкМ до 1 мМ. В одном варианте применения настоящего изобретения концентрация экстрактов Polygonum Multiforum Thunb в фармацевтической композиции составляет от 1 до 1000 г/л и предпочтительно от 1 до 100 г/л. В предпочтительном варианте применения настоящего изобретения фармацевтическая композиция настоящей заявки включает разбавитель, выбранный из группы, состоящей из воды, этанола, DMSO,ацетонитрила, буфера Hepes, фосфатного буфера, Tris-буфера, цитратного буфера, сыворотки, или прочих видов физиологически значимого растворителя или раствора и их смесей. Хозяином предпочтительно является человек. Существует ряд способов получения наночастиц серебра, имеющих разную форму и размерыK. Langmuir 2000, 16, 2604). Человеческий сывороточный альбумин (HAS) является самым распространенным белком плазмы в кровеносной системе. Ранее сообщалось, что данный сывороточный белок может применяться для стабилизации разных наночастиц металлов (ссылки: Xie, H.; Tkachenko A. G.; Glomm W. R.; Ryan J. A.;Polygonum Multiforum Thunb, оказывает синергическое действие, способствующее росту волос. Краткое описание фигур Фиг. 1 представляет собой фотографию Polygonum Multiforum Thunb. Фиг. 2 представляет собой фотографию таблеток РМТ, коммерчески доступных от компании ShouWu Pian, Shanghai Lei Yun Shang Pharmaceutical Co.Ltd. Фиг. 3 показывает прозрачную пленку 1 см 1 см с квадратом координатной сетки 0,2 см 0,2 см. Фиг. 4 представляет собой фотографии передней седлообразной области спины мыши после обработки в течение 8 недель контрольным носителем (только PVP, группа А), покрытыми PVP наночастицами серебра (нано-Ag-PVP, группа В) или покрытыми PVP наночастицами серебра, смешанными с 5% миноксидилом (группа С). Нано-Ag-PVP, по-видимому, индуцирует рост новых волос, в то время как добавление 5% миноксидила уменьшает данный эффект. Фиг. 5 представляет собой фотографии мышей после обработки в течение 8 недель контрольным носителем (только PVP), только 10% РМТ, 0,1 мМ, покрытыми PVP наночастицами (нано-Ag-PVP) или смесью 0,1 мМ нано-Ag-PVP и 10% РМТ. Фиг. 6 показывает процент зоны покрытия волосами кожи мышей в месте наложения повязки, обработанной только PVP (контрольный носитель), только 10% РМТ, 0,1 мМ нано-Ag-PVP и 0.1 мМ наноAg-PVP плюс 10% РМТ через 3, 4, 5, 6, 7 и 8 недель после обработки. Фиг. 7 показывает процент зоны покрытия волосами кожи бестимусных мышей в месте наложения повязки, измеренный после 8-недельной обработки растворами, содержащими (1) только нано-Ag-PVP,(2) нано-Ag-PVP плюс 1% (мас./об.) РМТ, (3) нано-Ag-PVP плюс 10% РМТ и (4) нано-Ag-PVP плюс 50% РМТ (n=6, 7, 8 и 7 соответственно, см. табл. 3.1.). Фиг. 8 показывает окрашивание Ki67 в коже (поперечный срез) бестимусных мышей, обработанных чрезкожно в течение 8 недель 0,1 мМ нано-Ag-PVP или 0,1 мМ нано-Ag-PVP плюс 10% РМТ. Фиг. 9 показывает гибридизацию in situ (ISH) для CD34 в поперечном срезе (400) кожи, обрабо-2 019739 танной нано-Ag-PVP или 0.1 мМ нано-Ag-PVP + 10% РМТ. Фиг. 10 показывает количество CD34+ клеток (с помощью ISH) на волосяной фолликул (подсчитаны в поперечном срезе волосяного влагалища, 400, аналогично показано на фиг. 9) в коже в месте наложения повязки мышей с разной обработкой. Фиг. 11 показывает измерения массы тела мыши, обработанной в разных режимах. Вариант осуществления изобретения Кроме того, обеспечено объяснение настоящего изобретения с помощью следующих примеров. Однако настоящее изобретение не должно рассматриваться как ограничивающееся ими. Среднему специалисту в данной области будет понятно, каким образом можно изменить приведенные в качестве примеров препараты для получения желаемых результатов. Примеры Материалы и способы Материалы. Все химические вещества, за исключением тех случаев, когда указано иначе, были приобретены у компании Sigma-Aldrich Chemical Co. Очистка лабораторной стеклянной посуды для приготовления наночастиц серебра Коническую колбу погружали в ванну с основным раствором (200 г гранул гидроксида натрия в 2 л дважды дистиллированной воды (ddH2O. Колбу отмывали ddH2O, затем водой MilliQ, и в конце концентрированной азотной кислотой. Смесь концентрированной соляной кислоты и концентрированной азотной кислоты (объемное соотношение =1:3) кипятили в конической колбе в течение 30 мин для удаления всех металлов в колбе. Коническую колбу затем отмывали водой MilliQ перед синтезом наночастиц серебра. Приготовление наночастиц серебра, покрытых человеческим сывороточным альбумином (HSA) 180 мг/л тринатрия цитрата безводного и 16 мл/л нитрата серебра добавляли в 1 л воды MilliQ и перемешивали в течение примерно 5 мин. Затем в смесь добавляли 50 мг порошка борогидрида натрия и перемешивали в течение 20 мин. После чего наблюдали желтый раствор и добавляли в раствор 12 г HSA. После полного растворения человеческого сывороточного альбумина (HSA) раствор фильтровали через 22 мкм фильтр. Раствор хранили при 4 С перед использованием. Приготовление наночастиц серебра, покрытых поливинилпирролидоном (PVP) Для приготовления 100 мл наночастиц серебра, покрытых поливинилпирролидоном (PVP), 5 г PVPK30 (от компании Sigma-Aldrich Ltd, США) растворяли в 100 мл 60% этанола, в который после полного растворения последовательно добавляли 100 мг порошка нитрата серебра. Затем в раствор добавляли 25 мг NaBH4 в 1 мл воды MilliQ. Конечный раствор, содержащий 0,1 мМ наночастиц серебра, хранили при 4 С перед использованием. Местная доставка тестируемых химических веществ бестимусным мышам Четырехнедельных самцов "голой" бестимусной мыши генетической линии Balb/c получали от компании Jackson Laboratory, США. Животных произвольно разделяли на разные группы для получения разных обработок путем ежедневного нанесения на область 1 см 1 см на спине туловища (воротниковая область или передняя седлообразная область) в течение 8 недель. Марлю 1 см 1 см смачивали раствором наночастиц серебра (покрытых HSA или PVP) и затем накрывали другим нерастягивающимся хлопковым бинтом шириной 4 см, с последующим растягивающимся бинтом шириной 4 см. Повязку фиксировали лейкопластырем. Через 8 недель обработки мышей умерщвляли смещением шейных позвонков, и кусочки кожи из областей перевязки измельчали и фиксировали 4% раствором параформальдегида для проведения анализа. Приготовление Polygonum Multiforum Thunb (РМТ) Три типа образцов было приготовлено и выделено из этанольного экстракта корней Polygonum Multiflorum Thunb:(A) Экстракты корня (см. фиг. 1) 100 г сухих корней РМ перетирали и погружали в 1000 мл 50% этанола (т.е., соотношение "корни 50% этанол" составило "1:10"). Через 48 ч раствор собирали, отфильтровывали и последовательно концентрировали при пониженном давлении с помощью вакуумного роторного испарителя. Концентрированные экстракты последовательно замораживали, высушивали и хранили при 4 С до использования. Сухие экстракты в количестве 10 г обычно получают из 100 г сухих корней РМТ. Для экспериментов 100 г порошка сухих экстрактов растворяли в 1000 мл (т.е. 10% мас./об.) ddH2O при 70 С и после полного растворения раствор РМТ хранили при 4 С до использования.(B) Растворение коммерчески доступных таблеток РМТ Раствор Polygonum Multiforum Thunb (РМТ), который использовали в данном исследовании, был также приготовлен растворением 100 г таблеток РМТ (коммерчески доступных от компании Shou WuPian, Shanghai Lei Yun Shang Pharmaceutical Co.Ltd, Китай, см. фиг. 2) в 1000 мл ddH2O при 70 С, и после полного растворения РМТ раствор хранили при 4 С до использования. Смесь РМТ с наночастицами серебра, покрытыми PVP Для приготовления смеси покрытых PVP наночастиц серебра с РМТ, раствор покрытых PVP нано-3 019739 частиц серебра готовили так, как описано выше, за исключением того, что PVP растворяли в чистом этаноле, вместо 60% этанола. 100 г/л раствора РМТ смешивали с 0,17 мМ раствором покрытых PVP наночастиц серебра в объемном соотношении 4:6. Расчет зоны покрытия волосами на обработанной коже. Зону покрытия волосами измеряли путем помещения прозрачной пленки 1 см 1 см (с координатной сеткой 0,2 см 0,2 см, как показано на фиг. 3) на кожу. Процент покрытия волосами рассчитывали у мышей с видимым ростом новых волос после обработки с помощью следующего уравнения:(Число квадратов, покрытых волосами/25)100% Гибридизация in situ (ISH) для CD34 и иммуноокрашивание для Ki67 Гибридизацию in situ для мышиных CD34 выполняли в залитых в парафин срезах толщиной 5 мкм фиксированных в формалине тканей. Залитые парафином препараты депарафинировали ксилолом и затем регидратировали в этаноле плавно меняющейся концентрации. После депарафинирования срезы инкубировали в растворе, содержащем 0,2 N HCl и 0,3% Triton при комнатной температуре в течение 30 мин и затем расщепляли 10 мг/мл протеиназы К (Invitrogen) при 37 С в течение 15 мин. Расщепление протеиназой К останавливали с помощью 0,1 М глицина в течение 10 мин, при комнатной температуре. Срезы отмывали в 2SSC и гибридизировали с 2 нг/мкл DIG-меченного смыслового и антисмыслового кРНК зонда в течение ночи при 46 С в буфере для гибридизации, содержащем 50% деионизированного формамида, 2SSC, 10% декстран сульфата, 5 Х раствор Денхардта, 0,25 мг/мл тРНК дрожжей, 0,5% SDS. Срезы отмывали в 2SSC/50% формамид при 46 С в течение 15 мин дважды, затем в 0,1XSSC/30% формамид при 46 С в течение 15 мин, затем в 0.1XSSC/30% формамид при комнатной температуре в течение 15 мин и в 0,1XSSC при комнатной температуре в течение 15 мин. Гибридизованные зонды детектировали с помощью овечьих анти-DIG F(ab) фрагментов (Roche), конъюгированных с щелочной фосфатазой, и развитие цвета с помощью раствора NBT/BCIP (Roche). Срезы затем заключали в среду для флуоресценции с DAPI (Vector Laboratories). DIG-меченный мышиный CD34 зонд соответствует нуклеотидам 379773 [NM133654 (mus musculus CD34 антиген (CD34), мРНК)]. Окрашивание для Ki67 выполняли в залитых парафином срезах толщиной 5 мкм фиксированных в формалине тканей. Залитые парафином препараты депарафинировали ксилолом и затем регидрировали в этаноле плавно меняющейся концентрации. Срезы последовательно нагревали в 10 мМ буфере цитрата натрия (рН 6,0) в течение 15 мин в микроволновой печи. Срезы затем окрашивали кроличьим анти-Ki67 антителом (LabVision, United States) в разведении 1 : 200 или такой же концентрацией очищенного кроличьего IgG (Zymed, США; в качестве изотипа) при 4 С в течение ночи. Затем срезы инкубировали в разведении 1 : 200 с антикроличьими козьими антителами IgG (H + L), конъюгированными с флуоресцентным красителем AlexaFluor 594 (Molecular Probes, США), при комнатной температуре в течение 1 ч. В конце срезы заключали в среду VECTASHIELD, содержащую DAPI (Vector Laboratories, США). Изображение изучали под флуоресцентным микроскопом (Nikon Е 600 микроскоп). Параллельно эксперименту были обеспечены положительные и негативные контроли. В качестве положительных контролей использовали срезы мышиной селезенки. В качестве негативных контролей использовали срезы кожи, окрашенные очищенным кроличьим IgG-первичным антителом. Ядерное окрашивание Ki-67 считалось положительным. Процент Ki67-положительных клеток определяли следующим образом:% Ki67-положительных клеток = Количество Ki-67 положительных клеток/Количество DAPI положительных клеток Измерение массы тела тестируемых животных Массу тела мышей измеряли на электрических весах два раза в неделю. Результаты 1. Чрезкожное (местное) нанесение 0.1 мМ покрытых PVP наночастиц серебра (нано-Ag) (нано-AgPVP) индуцировало рост волос у бестимусных мышей, в то время как смесь нано-Ag-PVP с 5% миноксидилом уменьшало такой эффект. Фиг. 4 представляет собой фотографии передней седлообразной области мыши после обработки с течение 8 недель контрольным носителем (только PVP, группа А), покрытыми PVP наночастицами серебра (нано-Ag-PVP, группа В) или покрытыми PVP наночастицами серебра, смешанными с 5% миноксидилом (группа С). Нано-Ag-PVP, по-видимому, индуцирует рост новых волос, в то время как добавление 5% миноксидила уменьшает данный эффект. Таблица 1.1. Процент области поверхности кожи, покрытой волосами, в месте наложения повязки после обработки в течение 8 недель контрольным носителем, 0,1 мМ нано-Ag-PVP или 0,1 мМ нано-AgPVP, смешанными с 5% миноксидилом. Добавление 5% миноксидила, по-видимому, уменьшает эффект нано-Ag-PVP (p0,001 с помощьюPS:р 0.001, в сравнении с нано-Ag-PVP 2. Смесь нано-Ag-PVP плюс 10% РМТ является более эффективной в отношении индуцирования роста волос, чем отдельно взятые нано-Ag-PVP, при этом отдельно взятый 10% РМТ не имеет эффекта. Как видно из фиг. 5, добавление РМТ синергирует действие 0,1 мМ нано-Ag-PVP в отношении роста волос. Мышей обрабатывали в течение 8 недель контрольным носителем (только PVP), только 10% РМТ, 0,1 мМ покрытыми PVP наночастицами (нано-Ag-PVP) или смесью 0,1 мМ нано-Ag-PVP и 10% РМТ. Мыши, обработанные нано-Ag-PVP + РМТ, имели значительно большую зону покрытия волосами,чем мыши, которых обрабатывали нано-Ag-PVP (группа правая нижняя по сравнению с левой нижней). Таблица 2.1. Эффективность терапии и процент покрытой волосами зоны в области кожи, на которую наложена повязка, у бестимусных мышей, обработанных в течение 8 недель только PVP (контрольный носитель), 10% РМТ, 0,1 мМ нано-Ag-PVP или 0,1 мМ нано-Ag-PVP плюс 10% РМТ. Эффективность терапии в каждой группе составила 0, 0, 75 и 91,7% соответственно. У мышей, у которых наблюдался рост волос, процент покрытой волосами зоны на коже в области наложения повязки составил 74,57,4 % для мышей, обработанных 0,1 мМ нано-Ag-PVP и 88,98,8% для мышей, обработанных наноAg-PVP плюс 10% РМТ. На фиг. 6 показан процент зоны покрытия волосами кожи в месте наложения повязки у мышей, обработанных только PVP (контрольный носитель), только 10% РМТ, 0,1 мМ нано-Ag-PVP и 0.1 мМ наноAg-PVP плюс 10% РМТ через 3, 4, 5, 6, 7 и 8 недель после обработки. На 7 и 8 неделе после обработки мыши, обработанные нано-Ag-PVP + РМТ, имели значительно более высокую зону покрытия волосами,чем те, которые были обработаны только нано-Ag-PVP. Эффективность терапии и фактический процент зоны покрытия волосами на 8 неделе также приведены в табл. 2.1. ( р 0,05; р 0,01). 3. 10% (мас./об.) РМТ обладает самым оптимальным синергическим действием РМТ при смешивании с раствором нано-Ag-PVP для способствования росту волос. Таблица 3.1. В отдельных экспериментах эффективность терапии и процент зоны покрытия волосами кожи в месте наложения повязки у бестимусных мышей измеряли после 8-недельной обработки растворами, содержащими (1) только нано-Ag-PVP, (2) нано-Ag-PVP плюс 1% (мас./об.) РМТ, (3) нано-AgPVP плюс 10% РМТ и (4) нано-Ag-PVP плюс 50% РМТ. Оптимальные эффекты стимуляции роста волос наблюдали при использовании нано-Ag-PVP с добавлением 10 или 50% РМТ (см. фиг. 7). Как видно из фиг. 7, процент зоны покрытия волосами кожи в месте наложения повязки у бестимусных мышей измеряли после 8-недельной обработки растворами, содержащими (1) только нано-AgPVP, (2) нано-Ag-PVP плюс 1% (мас./об.) РМТ, (3) нано-Ag-PVP плюс 10% РМТ и (4) нано-Ag-PVP плюс 50% РМТ (n=6, 7, 8 и 7 соответственно, см. табл. 3.1.). Оптимальные эффекты стимуляции роста волос наблюдали при использовании нано-Ag-PVP с добавлением 10% или 50% РМТ.р 0.001 между добавлением 0% и 10%, и также между 0 и 50%. Статистическое расхождение между добавлением 0 и 1%,или между 10 и 50% отсутствует. 4. Оба, нано-Ag-PVP и нано-Ag-PVP + 10% РМТ, индуцировали экспрессию Ki67 и CD34 клеток в корнях волос (по сравнению с мышами, обработанными только носителем), в то время как большее число CD34+ клеток наблюдали у мышей, обработанных нано-Ag-PVP + 10% РМТ. Фиг. 8 показывает Ki67 окрашивание кожи (поперечный срез) бестимусной мыши, обработанной чрезкожно в течение 8 недель 0,1 мМ нано-Ag-PVP или 0,1 мМ нано-Ag-PVP + 10% РМТ. Мыши в обеих обрабатываемых группах имели увеличенное количество Ki67 (+) клеток в корнях волос (левая колонка). Контроли изотипа представлены в средней колонке и DAPI, отражающий клеточные ядра, находится в правой колонке. Результаты являются иллюстрацией 3 независимых экспериментов. Фиг. 9 показывает гибридизацию in situ (ISH) для CD34 в поперечном срезе (400) кожи, обработанной нано-Ag-PVP или нано-Ag-PVP + РМТ. По сравнению с обработкой контрольным носителем(только PVP), обработка нано-Ag-PVP и нано-Ag-PVP + РМТ индуцировала более высокую CD34 мРНК экспрессию в волосяном влагалище, и большее количество CD34+ клеток было обнаружено в группе,обработанной нано-Ag-PVP + РМТ. Смысловой контроль для CD34 показан в левой колонке. Контрастное окрашивание DAPI для показа клеточных ядер представлено в нижнем ряду. Результаты являются иллюстрацией 3 независимых экспериментов. Фиг. 10 показывает количество CD34+ клеток (с помощью ISH) на фолликул волоса (рассчитан в поперечном срезе волосяного влагалища, 400, аналогично показан на фиг. 9) в коже в месте наложения повязки у мышей с разными обработками. Обработка с добавлением 10% РМТ в нано-Ag-PVP индуцирует значительно больше CD34+ клеток, чем обработка нано-Ag-PVP (p0,05). Результаты являются иллюстрацией 3 независимых экспериментов. 5. Местное нанесение в течение 8 недель не вызвало значительных изменений в прибавке веса. Фиг. 11 показывает измерение массы тела мышей, обработанных разными режимами. Массу тела мыши, находящейся на обработке, контролировали каждую неделю и не было значительного изменения массы тела мышей в разных группах в течение курса эксперимента, что указывает на то, что ни одна из обработок не вызвала значительного или заметного системного воздействия на общее состояние мышей. Замечание: nAg = нано Ag; РМТ, используемый здесь, составил 10% (мас./об.). ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Фармацевтическая композиция для увеличения роста волос, включающая эффективное количество наночастиц серебра, по меньшей мере один стабилизатор, этанольный экстракт корней PolygonumMultiforum Thunb и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый разбавитель. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, характеризующаяся тем, что один или более белков и/или пептидов, и/или поливинилпирролидон используются в качестве стабилизаторов. 3. Фармацевтическая композиция по п.2, характеризующаяся тем, что белок является выбранным из группы, состоящей из человеческого сывороточного альбумина или трансферрина. 4. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, характеризующаяся тем, что диаметр наночастиц серебра составляет от 1 до 100 нм и концентрация наночастиц серебра в композиции составляет от 10 мкМ до 10 мМ. 5. Фармацевтическая композиция по п.4, характеризующаяся тем, что концентрация наночастиц серебра в композиции составляет от 10 мкМ до 1 мМ. 6. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, характеризующаяся тем, что концентрация экстрактов Polygonum Multiforum Thunb в композиции составляет от 1 до 1000 г/л. 7. Фармацевтическая композиция по п.6, характеризующаяся тем, что концентрация экстрактов Polygonum Multiforum Thunb в композиции составляет от 1 до 100 г/л. 8. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, характеризующаяся тем, что разбавитель является выбранным из группы, состоящей из воды, этанола, DMSO, ацетонитрила, буфера Hepes, фосфатного буфера, Tris-буфера, цитратного буфера, сыворотки или других видов физиологически значимого растворителя или раствора, и их смесей. 9. Способ увеличения роста волос, включающий местное введение фармацевтической композиции по любому из пп.1-8 хозяину, нуждающемуся в этом. 10. Способ по п.9, характеризующийся тем, что хозяином является человек. 11. Применение фармацевтической композиции по пп.1-8 в производстве лекарственных препаратов для увеличения роста волос у хозяина. 12. Применение по п.11, характеризующееся тем, что хозяином является человек.